文/华中农业大学 陈昌福 曹丽敏 田辉 刘凯

草鱼塘头价格总体出现轻微波动

中山草鱼种下降0.2元/斤

(资料图片)

湖北、江西、江苏等地

草鱼塘头价有所回落

与上周相比最多下降0.3元/斤

同时

各地养殖持续受天气影响

局部出现病害、浮头等情况

陈昌福老师寄语

现在在全国范围内，由于长期以来水产养殖业者事实上都是在凭经验使用抗微生物药物的缘故，已经导致对养殖鱼类常见的细菌性疾病，采用水产用抗微生物药物难以取得理想的药物治疗效果了。如果这种使用抗微生物药物的用药方式不能得到彻底改变的话，抗微生物药物治疗养殖鱼类细菌性疾病的效果将会越来越差。

摘要：本文报道采用筛选到的抗微生物药物治疗养殖草鱼（Ctenopharyngodon idella）细菌性败血症效果的观察结果。从患细菌性败血症的草鱼体内分离致病性菌株，在对分离菌株完成药物敏感性测试的基础上，选择对分离菌株具有较好抑菌效果的抗微生物药物，根据养殖池塘中草鱼总体重计算用药量拌药物饵料口服给药。每天投喂药饵1次，连续投喂7 d为一个疗程。与此同时，用二氧化氯（ClO₂）制剂化水后在试验池塘中全池泼洒，使养殖水体中的ClO₂浓度达到0.30 mg/L，隔天再泼洒1次，在药物治疗期间共泼洒2次。在不同水产养殖区内对患细菌性败血症草鱼的药物治疗结果表明，采用对分离菌株敏感的抗微生物药物拌饵料投喂，同时在养殖水体中泼洒ClO₂杀菌相结合的药物治疗方法，对养殖草鱼细菌性败血症的治疗，能获得理想的治疗效果。

关键词 草鱼；细菌性败血症；抗微生物药物；二氧化氯（ClO2）；药物治疗

草鱼（Ctenopharyngodon idella）是我国各地淡水水产养殖区域的主要养殖鱼类品种。危害养殖草鱼的细菌性败血症（图1）是危害草鱼主要细菌性疾病之一，对各种规格的养殖草鱼的危害均非常严重。

为了寻找对养殖草鱼细菌性败血症的有效治疗方法，应辽宁省沈阳市辽中区刘二堡一些草鱼养殖业者的要求，从送检的患有草鱼细菌性败血症的鱼体内分离菌株，并在针对分离菌株完成对多种抗微生物药物敏感性测试的基础上，参考各种抗微生物药物对从患病鱼体内分离到的致病菌株显示出来的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC），选择合适的抗微生物药物，对患病草鱼进行了药物治疗。因为用这样的方法筛选到的抗微生物药物，在治疗草鱼细菌性败血症的过程中获得了良好的治疗效果，特将其药物治疗过程和结果整理出来，供广大的水产养殖业者参考。

1.材料与方法

1.1 患病草鱼的来源与疾病症状

2023年5月中旬，辽宁省沈阳市辽中区刘二堡一些水产养殖业者，将患细菌性败血症的养殖草鱼送来公司建设的“陈昌福鱼病防控实验室”（图2），请求协助诊治草鱼的细菌性败血症。据水产养殖业者介绍，这些患病草鱼养殖池塘中每天都有数量不等的养殖草鱼死亡。

患病草鱼的主要症状表现为，疾病发生初期草鱼摄食量大幅度下降，病鱼体表出现点状或块状红斑，鳍条基部出现红肿。破开腹腔检查时，可见肠道内没有食物，内脏中有面积不等的出血斑块（图1）和腹腔内有少量腹水（图3）。

随着病情的发展，患病鱼鳃部黏液增加，鳃丝尖端开始腐烂，体表开始出现溃疡，少量鳞片开始松动。部分饲养池中饲养的草鱼每天的死亡率达到3.0%~4.0%，个别饲养池的总死亡率超过40.0%。

1.2致病菌株的分离

取已经出现典型症状的患病鱼体，在无菌条件下，从患病草鱼的肾脏中采样，在脑心浸液琼脂（BHIA，）培养基平板上作划线分离，培养48 h后，从培养皿中挑取单个菌落进行纯培养。将已经得到分离、纯化培养的7个菌株（菌株编号分别为：CYLS001、CYLS002、CYLS003、CYLS004、CYLS005、CYLS006和CYLS007）作为分离菌株，供药敏感性检测用。同时，分别将不同菌株转接到斜面培养基上，低温条件下保存备用。

1.3供试药物

采用如表1所示17种抗微生物药物，完成了对从患病草鱼体内分离、纯化的7个菌株的药物敏感性检测。

1.4最小抑菌浓度（MIC）的测定

依日本化学疗法学会制定的标准法进行。即首先将供试抗微生物药物用适宜的容媒预溶后，经滤菌器过滤药液并且用灭菌生理盐水按照上述药物制剂中抗微生物药物的含量，分别稀释至1000~0.25mg/L的２倍稀释的系列药物浓度。然后用BHI液体培养基将各浓度的药物液稀释10倍，从而使各试管内培养基中的各种药物的浓度达到100~0.025 mL/L的2倍稀释的系列药物浓度。最后向每支盛有2.9mL培养基的试管中，加入0.10 mL菌体浓度为1.0×10⁶cfu/mL，将接种菌种后的试管置于25℃恒温培养箱中培养72h，经肉眼观察证实无细菌生长试管中的最低药物浓度，即为MIC。

2.结果

2.1分离菌株对各种抗微生物药物的MIC

本实验室先后完成了从各地送来患细菌性败血症的草鱼体内分离、纯化的7个分离菌株的收集，利用这些分离菌株对17种供试抗微生物药物兽药制剂完成的药物敏感性检测结果如表2所示。从表2所示结果可以看出，部分分离菌株已经对有些抗微生物药物产生了不同程度的耐药性。

2.2治疗用药物的选择及使用方法

根据对分离菌株进行的药物敏感性试验结果，选择对分离菌株具有较好抑菌效果的抗微生物药物作为拌饵口服药物，以抑制或者杀灭病鱼体内的致病菌。

根据养殖池塘内养殖草鱼的数量，计算出每个养殖池塘内药物用量后，首先将抗微生物药物混合在面粉糊中，充分搅拌均匀后（图4），再泼洒在投喂养殖草鱼的颗粒饲料上混合均匀，在阴凉处晾干后投喂。

按照药物敏感性检测结果，选择适宜药物并根据养殖池塘中草鱼总重量计算用药量，将制备的药物饵料每天投喂1次，连喂7 d为一个疗程。在投喂药物饵料的第1d，在试验池塘中泼洒ClO₂，临用前剪开ClO₂的包装袋，并准确称取所需量，用适量水将ClO₂溶解后，在试验池塘内全池泼洒，使饲养池水中的ClO₂浓度达到0.30 mg/L，间隔1d后再泼洒1次，连续泼洒2次。

对多家养殖业者饲养草鱼疾病的药物治疗结果证明，这种从患病草鱼体内分离致病菌株，在完成分离菌株对药物敏感性测定的基础上，选择对当地患病草鱼中分离菌株具有良好抑菌效果的抗生素类药物，并且按照分离菌株对抗生素药物的敏感性确定用药量后，实施精准给药的方法，草鱼的细菌性败血症是可以获得有效地治疗的。

关于引起草鱼细菌性败血症的致病菌，我们从来自不同养殖区域的患病草鱼体内，虽然分离、纯化到了7个菌株，但是，在完成分离菌株药物敏感性检测之前，并未进行分离菌株的种类鉴定。因为这些分离菌株均由患病草鱼肾脏中分离、纯化的，应该是属于致病性细菌，而且根据对这些菌株对抗微生物药物敏感性，选用的治疗疾病药物均可以有效地控制疾病的继续蔓延，也可以说明这些分离菌株是与养殖草鱼细菌性败血症有关的。

由细菌性病原引起的养殖鱼类疾病，水产养殖业者除了可以采用细菌性疫苗提前预防外，一旦疾病发生后，大都只能依靠采用各种抗菌药物进行治疗。但是，如果使用者对抗菌类药物的选择或者使用不当，如用药剂量不足或者没有按照药物适应症用药，以及随意混用各种抗微生物药物类药物的话，不仅难以获得理想的药物治疗效果，还可能会导致病原菌产生耐药性。

本研究采取从患病鱼体中分离菌株，在完成药物敏感性检测后，选择对分离菌株具有良好抑制和杀灭效果的药物用于治疗患病鱼类的细菌性疾病，有效地避免了上述现象的发生。因此，只有选择对分离致病性菌株具有良好抑制和杀菌效果的抗微生物药物，精准地取其用药量拌和在草鱼的饵料中连续投喂7d（根据治疗效果灵活掌握其用药疗程），是可能能有效地控制草鱼细菌性败血症蔓延的。

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作者：华中农业大学 陈昌福 曹丽敏 田辉 刘凯

编辑：杨天智（微信号：zhengyyun11，欢迎新闻爆料、转载授权请加微信）

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